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阿留申病病毒探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒樣品RNA的抽提

點(diǎn)擊次數(shù):669 更新時(shí)間:2022-09-27

阿留申病病毒探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒樣品RNA的抽提:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。

2 RNA質(zhì)量檢測(cè)

1)紫外吸收法測(cè)定

先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。

① 濃度測(cè)定

A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計(jì)算公式為:A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。

alpha 1 Fetoprotein甲胎蛋白抗體

ATM毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體

ABCF2ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體

ABLIM3肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體

Acidic Calponin酸性鈣調(diào)蛋白3抗體

phospho-ADAM17 (Thr735)磷酸化CD156b抗體

ADH5乙醇脫氫酶5抗體

ADH6乙醇脫氫酶6抗體

AGPAT5溶血磷脂?;D(zhuǎn)移酶5抗體

AIPL1遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1抗體

AIRE免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體

phospho-AKT1 (Ser473)磷酸化蛋白激酶AKT1抗體

phospho-AKT1 (Thr72)磷酸化蛋白激酶AKT1抗體

phospho-AKT1 (Tyr326)磷酸化蛋白激酶AKT1抗體

ALDH1A2乙醛脫氫酶2型抗體

ALDH9A1γ-氨基丁酸醛脫氫酶抗體

AGPS衰老相關(guān)蛋白5抗體

phospho-alpha B Crystallin (Ser59)磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體

AMBN釉基質(zhì)蛋白抗體

phospho-AMPK alpha 2 (Ser176)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體

phospho-AMPK alpha 2 (Ser491)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體

phospho-Androgen Receptor (Ser515)磷酸化雄激素受體抗體

phospho-Androgen Receptor (Ser791)磷酸化雄激素受體抗體

phospho-Androgen Receptor (Ser94)磷酸化雄激素受體抗體


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