大鼠Elisa試劑盒實驗操作步驟及標本的處理
點擊次數(shù)：934 更新時間：2018-10-09
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ELISA試劑盒操作時包括6個步驟：
1）抗原或抗體吸附于固相
2）加標本和試劑
3）孵育和沖洗
4）加酶標抗原或抗體
5）加適當?shù)牡孜?br />6）檢測和分析結(jié)果
實驗時標本的處理：
A、請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預留充足的樣本。
B、實驗前應(yīng)預測標本含量，如果標本濃度過高，應(yīng)對標本進行稀釋，使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)，標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。
C、若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中，建議進行預實驗驗證其有效性，并注意留存樣本。
D、使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于化學物質(zhì)的引入導致ELISA實驗結(jié)果偏差。
E、若樣本為細胞培養(yǎng)上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等，所以可能存在檢測不出的情況。
F、某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。
G、建議使用新鮮樣本，保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結(jié)果偏差。
